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2020-05-21

胎牛血清是一種性狀、外觀淺黃色澄清、無溶血、無異物稍粘稠液體。胎牛血清應取自剖腹產(chǎn)的胎牛;新牛血清取自出生24小時之內(nèi)的新生牛;小牛血清取自出生10-30天的小牛。如何擇取胎牛血清的質(zhì)量:1、內(nèi)毒素標準為不高于5EU/ml。內(nèi)毒素是細菌破碎后細胞壁的成分,因此內(nèi)毒素含量的高低可表現(xiàn)出采血到生產(chǎn)一系列過程中的無菌操作情況。目前,國產(chǎn)血清基本都能達到這一要求,很多進口胎牛血清內(nèi)毒素含量反而更高,只要求不高于50EU/ml,高出我國標準10倍。可見,內(nèi)毒素含量偏高不影響質(zhì)量,除非含...

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2020-05-19

ELISA試劑盒的保質(zhì)期一般都是在一年,假設保存妥當?shù)脑挘粫霈F(xiàn)疑問的。但不要重復凍融。當然假設是正常的DAS-ELISA查看試劑盒等,應當放在4℃支配冰箱保存。建議ELISA試劑盒凍結(jié)后一次用完。已開封或許運用后,剩余試劑仍需按照試劑瓶標簽所示的溫度保存,ELISA查看試劑盒開封后的酶標板要加干燥劑后密封保存于-20℃,避免濕潤。但要留意的是,假設將ELISA試劑盒剛從冰箱里面拿出來就當即運用的話,也許會影響,其直接的效果是對一些弱陽性標本的查看出現(xiàn)假陰性。建議:先從冰箱...

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2020-05-13

ELISA試劑盒價格加樣時的防錯小經(jīng)驗(1)用一張寫滿字的紙,字越多越好,比如報紙,墊在下面,這樣,加過標本的小孔看過去下面的字會變小,沒加的字正常,非常容易區(qū)分。(2)可以利用液面反光與沒有加的孔加以區(qū)別(3)在標本加完后,再把加樣槍全壓下,使液面產(chǎn)生小氣泡,也可以加以區(qū)分ELISA試劑盒試驗的操作方法:(1)將抗原按一定的梯度倍比稀釋后,按照ELISA從上到下(或者從左到右)的順序包被。(2)將抗體按一定的梯度倍比稀釋后按照ELISA從左到右或者從上到下加入。(3)二抗的...

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2020-04-28

污染向來是在細胞培養(yǎng)中的大問題。預防或治理污染是細胞培養(yǎng)成功的關(guān)鍵因素。我們在細胞培養(yǎng)時,在開始階段就要十分重視污染問題,否則會前功盡棄,這樣不僅浪費時間,也會浪費人力、物力。(一)有哪幾類污染?在細胞培養(yǎng)過程中的污染不只是指微生物,而且還包括所有混入培養(yǎng)環(huán)境中的、對細胞生存有害或造成細胞不純的物質(zhì),包括生物和化學物質(zhì)。1、細菌污染細菌污染是實驗室細胞培養(yǎng)中常見的污染,即使在細胞培養(yǎng)液中加入了抗菌素,也可能因為操作不慎而引起污染。見的有革蘭氏陽性菌,如枯草桿菌以及大腸桿菌、假...

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2020-03-31

在ELISA試劑盒實驗中常見原因如下:a)可能原因:加樣本及試劑量不準;孔間不一致;解決方法:校正移液器,吸嘴要配套,裝吸嘴時要緊密。重復某一樣品時,加樣時間盡可能與在次接近;重復測定標本,操作條件、人員等應盡可能與上次保持一致,以排除這些因素造成的不一致的可能性;樣品稀釋前應充分混勻。b)可能原因:加樣過快,孔間發(fā)生污染;解決方法:重復測定標本,操作條件、人員等應盡可能與上次保持一致,以排除這些因素造成的不一致的可能性;加樣不要過快。c)可能原因:加錯樣本;解決方法:檢查記...

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2020-03-25

當重要的培養(yǎng)污染時,研究者可能試圖消除或控制污染。首先,確定污染物是細菌、真菌、支原體或酵母,把污染細胞與其它細胞系隔離開,用實驗室消毒劑消毒培養(yǎng)器皿和超凈臺,檢查HEPA過濾器。高濃度的抗生素和抗霉菌素可能對一些細胞系有毒性,因而,做劑量反應實驗確定抗生素和抗霉菌素產(chǎn)生毒性的劑量水平。這點在使用抗生素如兩性霉素B和抗霉菌素如泰樂菌素時尤其重要。下面是我司推薦的確定毒性水平和消除培養(yǎng)污染的實驗步驟:1.在無抗生素的培養(yǎng)基中消化、計數(shù)和稀釋細胞,稀釋到常規(guī)細胞傳代的濃度。2.分...

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2020-03-23

非特異染色的原因包括一抗和二抗與血清蛋白的相互作用,抗體與組織之間的離子相互作用,以及與能夠影響IHC檢測系統(tǒng)的內(nèi)源分子的相互作用。這些問題會產(chǎn)生高背景,以及無法在適當?shù)募毎恢糜^察目的抗原。這種類型的染色問題可通過用封閉劑來封閉非特異相互作用來解決。在將樣本與一抗共同孵育之前,可開展這些步驟預防非特異疏水相互作用盡管疏水相互作用在抗原表位-抗體的結(jié)合中起了重要作用,但這些力同樣能促進非特異結(jié)合。由于一些氨基酸的中性側(cè)鏈,大部分蛋白有著某種程度的疏水性。將組織與熱滅活的正常血...

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