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2019-07-19
蛋白酶k是一種枯草蛋白酶類的高活性蛋白酶,用于生物樣品中蛋白質(zhì)的一般降解。從林伯氏白色念球菌中純化得到。該酶有兩個(gè)ca2+結(jié)合位點(diǎn),它們離酶的活性中心有一定距離,與催化機(jī)理并無直接關(guān)系。然而,如果從該酶中除去ca2+,由于出現(xiàn)遠(yuǎn)程的結(jié)構(gòu)變化,催化活性將喪失80%左右,但其剩余活性通常已足以降解在一般情況下污染酸制品的蛋白質(zhì)。所以,蛋白酶k消化過程中通常加入edta(以抑制依賴于mg2+的核酸酶的作用)。但是,如果要消化對(duì)蛋白酶k具有較強(qiáng)耐性的蛋白,如角蛋白一類,則可能需要使用...2019-07-15
1.收到細(xì)胞,時(shí)間要鏡檢:觀察細(xì)胞形態(tài)是否正常,對(duì)于貼壁細(xì)胞則要注意看貼壁情況是否很好,觀察細(xì)胞密度,有疑議及時(shí)咨提供細(xì)胞的技術(shù)人員。由于運(yùn)輸?shù)臅r(shí)間或者溫度的變化,很多貼壁細(xì)胞在盛滿培養(yǎng)基的瓶子里生長(zhǎng)的狀態(tài)和平時(shí)會(huì)有點(diǎn)不一樣,主要是貼壁牢固問題。比如293T,平時(shí)貼壁就不是很牢,在裝滿的培養(yǎng)基瓶子里面,會(huì)發(fā)生大片的脫落,細(xì)胞聚集在一起,但是細(xì)胞生長(zhǎng)還是正常的,通過離心收集,加以胰酶的消化,重新打散,又可以正常的貼壁生長(zhǎng)。2.當(dāng)通過上一步的觀察,細(xì)胞初步?jīng)]有任何問題時(shí),進(jìn)行下一...2019-07-08
內(nèi)毒素是革蘭氏陰性菌細(xì)胞壁上的一種脂多糖(LipopolySaccharide,LPS)和蛋白的復(fù)合物,當(dāng)細(xì)菌死亡或自溶后便會(huì)釋放出內(nèi)毒素。內(nèi)毒素大量進(jìn)入血液就會(huì)引起發(fā)熱反應(yīng)—“熱原反應(yīng)”。內(nèi)毒素與多種感染疾病密切相關(guān),病情惡化往往伴隨著內(nèi)毒素含量的增加,病情緩解也常伴隨著內(nèi)毒素含量的減少。因此,快速檢測(cè)(1小時(shí))血液、臟器內(nèi)毒素含量可以為臨床相關(guān)疾病的診斷預(yù)后提供參考。內(nèi)毒素測(cè)定方法有:凝膠法系通過鱟試劑與內(nèi)毒素產(chǎn)生凝集反應(yīng)的原理來定性檢測(cè)或半定量?jī)?nèi)毒素的方法。凝膠法鱟試劑...2019-07-05
ELISA試劑盒的操作法,您做對(duì)了么?上海滬鼎生物科技有限公司常年供應(yīng)ELISA試劑盒,為確保試驗(yàn)的成功,使用ELISA試劑盒時(shí)一定要注意相關(guān)的事項(xiàng),今天,我們主要介紹人白介素ELISA試劑盒操作步驟。1.確定本次檢測(cè)所需的已包被抗體的酶標(biāo)板孔數(shù)目。2.將倍比稀釋的標(biāo)準(zhǔn)品各0.1ml依次加入一排7孔中,1孔只加樣品稀釋液的作為對(duì)照。處理后的標(biāo)本按100ul每孔加入。3.酶標(biāo)板加上蓋,37℃反應(yīng)90分鐘。4.反應(yīng)后用自動(dòng)洗板機(jī)吸去酶標(biāo)板內(nèi)的液體;或甩去酶標(biāo)板內(nèi)液體,再對(duì)著吸水紙...2019-07-01
隨著梅雨季節(jié)的到來,都開始頭疼如何防潮、防霉、防各種化學(xué)揮發(fā)變質(zhì)。化學(xué)試劑在儲(chǔ)存過程中由于本身的性質(zhì)受到外界條件因素的影響,會(huì)發(fā)生這樣或那樣的變化引起質(zhì)變。試劑變質(zhì)現(xiàn)象較多,現(xiàn)介紹常見的變質(zhì)現(xiàn)象及預(yù)防措施。(1)潮解。潮解是一些易溶于水的固體試劑,由于吸收空氣中的水分,逐漸變成液體的現(xiàn)象。發(fā)生潮解的速度取決于空氣的相對(duì)濕度,相對(duì)濕度愈大,潮解速度越快。相對(duì)濕度越小,溶解速度就越慢或不潮解。如氯化鈣、乙酸鉀、硝酸鈣等極易潮解,潮解后試劑的形態(tài)發(fā)生了改變,但原有的化學(xué)性質(zhì)通常不發(fā)...2019-06-28
通過閱讀文獻(xiàn)了解世界上本專業(yè)領(lǐng)域的內(nèi)容和發(fā)展情況;并產(chǎn)生自己的idea,進(jìn)入這個(gè)領(lǐng)域。這是我們?cè)趯懽鱏CI之前大量閱讀文獻(xiàn)的主要目的。那么,漫無目的地閱讀是沒有意義的,我們應(yīng)該做到:1.別先讀摘要,從導(dǎo)言部分入手。摘要是論文文首那簡(jiǎn)短精煉的*段話。事實(shí)上,很多非科研人員在試圖建立一種科學(xué)觀點(diǎn)時(shí),常常就只讀一篇論文的摘要部分。(這是一種很糟糕的做法。別這樣。)總是zui后才閱讀摘要,因?yàn)槟抢锇藢?duì)整篇論文的簡(jiǎn)要概括,容易在無意之間被作者對(duì)結(jié)果的解讀灌輸了先入之見。2.找出大問...2019-06-21
滬鼎報(bào)道:作為人類機(jī)體免疫系統(tǒng)的一部分,白細(xì)胞可以產(chǎn)生許多幫助抵御疾病的酶類,有時(shí)候這些酶類會(huì)在炎性疾病中損傷組織,比如慢性阻塞性肺病、癌癥和心臟病;近日,研究人員的研究鑒別出了一種名為MMP12的酶類,該酶類在抵御感染期間并不會(huì)一直位于細(xì)胞外部,其會(huì)進(jìn)入到細(xì)胞中來發(fā)揮作用,該研究對(duì)于開發(fā)治療炎性疾病的新型療法或會(huì)帶來較大幫助。研究者說道,曾經(jīng)研究人員認(rèn)為這些酶類會(huì)一直位于細(xì)胞外部發(fā)揮作用,如今這種名為MMP12的酶類則可以結(jié)合細(xì)胞進(jìn)入到細(xì)胞核中來作用,后期我們將深入揭開該酶...