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2016-09-08
ELISA實驗常見問題分析異常結果描述原因分析對策白板顯色步驟結束后，酶標板所有孔均無顏色。陽性對照不顯色。試劑已過效期，或不同試劑盒組分混用檢查試劑的組分及批號，確認未過期以及所有組分均屬對應的試劑盒。不同試劑盒或不同批號的試劑不能混用。錯加、漏加試劑底物、顯色劑A或B嚴格按說明書的步驟操作，加完試劑后可觀察一下液面高度是否一致，以減少漏加現象。洗板及加樣過程中，酶標受污染失活失去催化顯色劑顯色的能力確認盛酶標的容器不含酶抑制劑如疊氮鈉等，確認配制洗液的容器已洗干凈。終止液...2016-09-05
二抗在IF、IHC、WB、ELISA、FC、EMSA、IP和CHIP等多種研究應用中起到重要作用。正確選擇二抗可以增加信號檢測，減少背景和非特異染色，優化您的實驗結果。如何選擇二抗？1.根據一抗的種屬來源：GoatantiMouseIgG(H+L),HRP2.根據一抗的類別亞型：GoatantiMouseIgG(H+L),FITCGoatAntiRabbitIgG(γ),PEGoatAntiMouseIgM,FITC3.根據實驗檢測方法：熒光、化學發光、顯色？Goatanti...2016-08-31
經甲醛固定的部分組織細胞，因固定過程中可能會形成醛鍵或羧甲基而封閉部分抗原決定簇，使免疫組化標記敏感性明顯降低，因此在染色前，有些抗原需進行修復或暴露。抗原修復方法可分為化學方法和物理方法。化學方法是以酶消化方法，常用胰蛋白酶及胃蛋白酶，配制濃度與消化時間要適度。常用的物理方法有單純加熱、微波處理和高壓加熱。在選用這三種方法時，浸泡切片的緩沖液的離子強度和pH、加熱的溫度和時間均影響著抗原修復效果。1、pH的應用范圍及選擇抗原修復液的pH非常重要，有效的抗原修復pH要比修復液...2016-08-24
良好的免疫組化染色切片是正確判斷染色結果的基礎和前提。由于免疫組化染色過程中存在很多步驟或環節，每一個步驟或環節都可能影響到染色的zui終結果，因此，要做好一張高質量的免疫組化切片并不是一件非常容易的事。需要病理技術員和病理醫生密切配合、相互協調、共同努力才能保證做出合格的免疫組化切片。雖然免疫組化染色可以存在各種各樣的問題，但從染色的結果看，一般可分為兩類：無色片（即無陽性信號）和“雜音”染色片（有陽性信號）。一、無色片染色結束后，切片中見不到任何陽性信號。這是常規工作中比...2016-08-18
ELISA試劑盒實驗對照各有所用：一般陽性對照是用來檢測試驗系統是否正確，若陽性對照為陰性，說明檢測系統不正確；陰性對照一般是用無關抗原，陰性對照通常是排除試劑盒檢測中是否存在非特異性吸附現象，若陰性對照為陽性，說明抗體能夠非特異性結合無關抗原，那么用于檢測標本，其特異性就值得懷疑了；空白對照主要是檢測各個步驟中試劑是否有問題，也可以檢測是否有非特異性吸附現象，具體又可以分包被空白對照、抗原空白對照、一抗空白對照、酶標抗體空白對照……，正規的商品化的試劑盒經過條件優化，只需要...2016-08-15
ELISA試劑盒的實驗操作所要求的條件是比較嚴格的，無論是對實驗的硬件條件還是對實驗的操作人員的技術要求，都是如此。因此在做ELISA實驗時，一定要注意以下幾點。1、要保證移液槍的準確性，誤差不能超過2%。可用水和電子天平進行確定。但有專業人員進行矯正。2、要配備20ul、50ul、100ul、1000ul和排槍各一支。吸取不同的液體后，要更換槍頭。即使是吸取標準品時。3、要在實驗前1小時將試劑盒從冰箱中取出，使各種試劑都恢復到室溫，以使結果更穩定。4、實驗時，要使底物避光保...2016-08-10
elisa試劑盒實驗中的封閉液小知識ELISA的試劑盒說明上寫封閉液用蔗糖溶液，一般是用BSA或酪蛋白的蛋白分子封閉空白位點，蔗糖封閉的原理：1、ELISA實驗中，蔗糖本身沒有封閉作用;2、封閉液一般是BSA、酪蛋白等或者是Tween等。3、加蔗糖的主要目的是保護ELISA板子吸附(包被)的蛋白，起到“保護劑”的作用。4、蔗糖溶液一般在ELISA板子經過BSA封閉后加，當然也有將蔗糖加到封閉液中同時進行處理;那一種更好需要你實驗后來驗證。但多數選擇前者。封閉劑還可用5%的脫脂...